Entecavir: metodologia analítica por CLAE, estudo de estabilidade e compatibilidade IFA-excipientes
Nome: ARIADNE BOTTO FIOROT
Tipo: Dissertação de mestrado acadêmico
Data de publicação: 01/09/2021
Orientador:
Nome |
Papel |
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| MARCELO ANTÔNIO DE OLIVEIRA | Orientador |
Banca:
| Nome |
Papel |
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| FERNANDO HENRIQUE ANDRADE NOGUEIRA | Examinador Externo |
| GRACIELLE FERREIRA ANDRADE | Examinador Interno |
| MARCELO ANTÔNIO DE OLIVEIRA | Orientador |
Resumo: O entecavir (ETV) é um inibidor da síntese de DNA do vírus da hepatite B (HBV) e tem sido amplamente prescrito no tratamento das infecções crônicas causadas pelo vírus. Em 2015, foi incorporado à Lista de Medicamentos Essenciais da Organização Mundial de Saúde (OMS) e, no Brasil, consta da Relação Nacional de Medicamentos Essenciais (RENAME) 2020. Entecavir apresenta polimorfismo e sua forma cristalina ativa abriga uma molécula de água; ETV apresenta também estereoisomeria devido à presença de três centros quirais em sua estrutura molecular. Apesar da grande relevância terapêutica e presença no mercado mundial, ainda há lacunas na publicação de estudos de estabilidade do ETV, especificamente quanto à sua cinética de degradação e compatibilidade com excipientes usados nas formulações farmacêuticas. Neste trabalho, foram feitos estudos de degradação do entecavir em meio líquido e avaliação da compatibilidade ETV-excipientes com os insumos declarados nas formulações de mercado. A determinação de ETV foi realizada através de Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE), com método desenvolvido e validado nas seguintes condições: fase móvel de água e acetonitrila na proporção 92:8, fluxo de 1,0 mL.min-1, temperatura de 30 °C, injeção de 50 μL, coluna octadecilsilano (RP-18) de 250 x 4,6 mm com partículas de 5 μm e detecção em 254 nm. O estudo de degradação forçada foi realizado com HCl 0,01 M como diluente da solução padrão do IFA (pH 2,0) e revelou que ETV é estável quando exposto ao calor, à luz UV, a íons metálicos e às hidrólises neutra, básica e ácida; no entanto, o fármaco mostrou vulnerabilidade à oxidação quando exposto a peróxido de hidrogênio 3%, com redução importante do teor. Os estudos cinéticos de degradação foram realizados sob condição oxidativa em dois meios distintos: pH 2,0 (com HCl 0,01 M, o diluente do método validado) e pH 6,0 (com tampão citrato, presente na formulação oral de ETV). Em meio ácido, cálculos extrapolados demonstraram que o tempo de vida útil (t90) do ETV a 25°C é de 2,26 dias quando em contato com H2O2 a 3%. Em meio com tampão citrato e pH 6,0, ETV mostrou-se estável e não teve seu teor reduzido em condição oxidativa, o que indica importante influência do pH na estabilidade de formulações líquidas de entecavir. As análises térmicas por Termogravimetria (TGA) e Análise Térmica Diferencial (DTA) indicaram compatibilidade do entecavir com os excipientes celulose microcristalina, crospovidona, dióxido de titânio, estearato de magnésio, hipromelose, polietilenoglicol (macrogol), povidona e citrato de sódio, o que foi confirmado pela técnica de CLAE. Os ensaios de compatibilidade por CLAE demonstraram ainda não haver interação química de ETV com os excipientes ácido cítrico anidro e manitol. A lactose monoidratada mostrou-se incompatível com o ETV nos ensaios de compatibilidade por análises térmicas e por CLAE. Recomenda-se, para formulações líquidas contendo ETV: uso de antioxidante em concentração adequada, com pH do meio igual a 6,0; uso de frasco âmbar; envase com volume máximo do frasco e uso de gás hélio no tanque de agitação; abrigo do medicamento contra a luz e o calor. Para formulações sólidas de ETV, recomenda-se a substituição do diluente solúvel lactose, pelo excipiente manitol, de mesma função na formulação.
Palavras-chave: entecavir, estabilidade, cinética de degradação, compatibilidade de formulação farmacêutica.
